[자연과학] 일반생물학 test(실험) - Polymerase chain reaction(PCR)
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작성일 22-09-24 07:18
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이 PCR techinique은 유전자를 연구, 분석하는 분자유전학에 혁신을 일으켰다.[자연과학] 일반생물학 test(실험) - Polymerase chain reaction(PCR)
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[자연과학] 일반생물학 test(실험) - Polymerase chain reaction(PCR)
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실험과제/생물의학
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Polymerase chain reaction(PCR) technique은 1980년대 중반 K. Mullis에 의해서 고안된 기술이다. DNA polymerase가 외가닥 DNA를 주형으로 해서 상보적인 DNA를 합성한다. 이러한 외가닥 DNA는 두가닥 DNA를 끓임(denature, 변성)으로써 간단하게 얻을 수 있따 DNA polymerase가 DNA합성을 처음 하게 위해서는 처음 부위가 두가닥 DNA로 되어 있어야한다. 그러나, Thermus aquaticus라는 온천에 사는 세균이 발견되면서 이 문제는 해결되었다. 일단 primer가 결합한후에는 DNA polymerase의 작용으로 DNA 합성이 반대편 끝까지 진행(extend)된다 이렇게 1)denature, 2)anneal, 3)extend가 한 cycle이 된다 다음 cycle에서 original DNA와 새로 합성된 DNA가 분리되어 외가닥 DNA 주형이 된다 따라서, n cycles 후에, 理論(이론)적으로 2n의 두가닥 DNA가 존재하게 된다
DNA를 변성시키면 DNA polymerase 도 같이 변성되므로 매 cycle마다 DNA polymerase를 넣어주어야 했었다. 따라서, 증폭시킬 DNA sequence의 양 끝에 상보적으로 결합할 수 있는 작은 DNA조각(oligonucleotide primer)을 함께 넣어주면 이 primer가 특정 DNA sequence의 양 끝에 가서 결합(anneal)해 DNA polymerase가 DNA 합성을 처음 할 수 있도록 해준다. 이 세균의 DNA polym…(생략(省略))
순서
다. 유전자를 분석하고 연구하는데 있어서 가장 큰 문제가되는점 은 복잡한 전체 genome중에 연구하고자 하는 유전자가 희귀하다는 것인데, PCR은 특정 DNA Sequence의 copy수를 기하급수적으로 증폭시킬 수 있따
PCR은 DNA polymerase에 의한 DNA 복제의 특징을 이용한다.
