생물학 실험 - 효소의 활성에 미치는 온도, pH, salt의 영향
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작성일 23-01-23 17:27
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기질분자들은 활성 부위라고 불리는 효소 표면의 특정자리에 결합하여, 그곳에서 촉매reaction response이 일어난다.
(2) 방법
2. MATERIALS & PROCEDURE
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순서
α-amylase (from Bacillus amyloiquefaciens) (효소), 1% starch 용액(녹말), 0.1N Iodine 용액, pH 3.0, 7.0, 10.0 TE buffer (Tris-EDTA buffer), D.W(증류수), 5%, 10%, 20% NaCl 용액, 항온수조(water bath), 시험관, 시험관대, 파이펫, 얼음, 온도계
ABSTRACT 1) 실험목표 본 실험에서는 α-amylase로 인한 starch의 가수분해 과정을 확인한다.
효소에는 기질특이성이라고 하여 특정 기질과만 reaction response하는 성질이 있다.
생물학 실험 - 효소의 활성에 미치는 온도, pH, salt의 영향
3) ①②번 시험관은 4℃(얼음), ③④번 시험관은 40℃(water bath),
왼쪽의 그림은 α-amylase이다. 다른 모양, 작용기 또는 성질을 지닌 기질분자들은 효소의 활성부위에 결합할 수 없다. 알파 아밀라아제말고도 베타, 감마형도 있으나 그것은 나중에 기회가 되면 더 살펴보겠다. 칼슘이 있어야 활성화되어 작용할 수 있다. 이것은 식물에도 가끔 발견되고 ascomycetes와 basidiomycetes라는 균류에서도 발견되며 박테리에서도 발견되기도 한다. 이런 기질 특이성은 효소활성부위의 정교한 3차원적 모양과 구조의 결과다.
본 실험에서는 α-amylase로 인한 starch의 가수분해 과정을 확인한다. α-amylase의 유무에 따라 starch의 분해도가 어떻게 달라지는지를 확인하도록 한다. 또, 어떤 온도, pH, 농도 조건에서 효소 α-amylase가 가장 잘 활성화되는지를 알아보는 실험을 해본다
설명
다. 아밀로오스를 maltotriose와 maltose로 쪼개고, 아밀로펙틴을 포도당과 덱스트린으로 쪼갠다. 활성부위에 기질이 정확하게 부착하는 것은 수소결합, 정전기적인력, 반발력, 소수성결합력 등에 의존한다. 또, 어떤 온도, pH, 농도 조건에서 효소 α-amylase가 가장 잘 활성화되는지를 알아보는 실험을 해본다
(1) 재료
ABSTRACT
2) 각 시험관에 2㎖의 1% starch 용액, TE buffer(pH 7.0) 1㎖,D.W(증류수)1㎖을 넣었다. α-amylase의 유무에 따라 starch의 분해도가 어떻게 달라지는지를 확인하도록 한다.
實驗(실험)1. 효소의 활성에 미치는 온도의 effect 實驗(실험)
⑤⑥번 시험관은 70℃(water bath)에서 5분간 incubation했다.
1) 실험目標(목표)
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생물학 실험,효소의 활성에 미치는 온도, pH, salt의 영향
1) 6개의 시험관에 ①~⑥라고 표시를 했다.
